文献解读 06|《Onco Targets Ther》CTCs作为非小细胞肺癌早期筛查和诊断的标志物
2020年3月，河北省人民医院在《OncoTargets and Therapy》期刊发表文献，探究循环肿瘤细胞（CTCs）在非小细胞肺癌患者的早期筛查与诊断方面的可行性，研究纳入64例样本（44例需要手术的疑似肺癌患者与20例健康人群），通过分析CTCs检出率、CTCs PD-L1阳性率与CTCs拷贝数变异（CNV），发现该策略对早期肺癌诊断和敏感性和特异性分别可达52.94%和90%，研究认为CTCs可有效区分良/恶性结节，并可用于肺癌的早期诊断。
论文题图
肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，其早期症状不明显，大多数患者诊断时便为晚期，容易错过最佳治疗机会。据悉，IV期肺癌5年生存率仅为6%，而IA期肺癌的五年生存率可达82%，因此，肺癌的早期诊断是改善预后、降低死亡率的关键因素。目前临床多采用低剂量螺旋计算机断层扫描（LDCT）的方式来进行肺癌的早期筛查，相比X射线成像，LDCT可降低20%的肺癌相关死亡，然而，LDCT筛查假阳性较高，超过10%的患者被过度诊断，因此，迫切需要一种特异性更高的生物标志物。
该项研究是一项单中心、前瞻性的临床研究，纳入44例疑似肺癌患者与20例健康人，所有患者在接受手术和病理检查前采集CTCs，进行免疫荧光染色和下游NGS分析。根据临床统计信息，疑似肺癌患者与健康对照组在年龄、性别和吸烟史的方面没有显著差异，研究还统计了患者肺部结节位置，发现左上叶、右中叶存在结节的患者CTCs阳性率相对较高。
入组患者特征
这项研究分别使用CD45和CK7/19/panCK测定白细胞和肿瘤细胞。具有完整形态、CD45-、CK7/19/panCK+、Hoechst+细胞被认为是CTCs，而CD45+、CK7/19/19/panCK-、Hoechst+细胞被视为白细胞。此外，研究还评估了CTCs PD-L1表达情况，在36、39、42和44号患者中均捕获到了PD-L1阳性的CTCs。
CTCs的收集和鉴定
为了确定CTCs与临床特征之间的相关性，团队分析了CTCs的检测率和CTCs数目。在44名患者中，19例患者（43.18%）为CTCs阳性（≥1 CTC），其中11例患者CTCs PD-L1阳性（57.89%），而健康人则未检测出CTCs。另外，研究还根据病理结果将患者分为良性疾病组（N=10）和肺癌患者组（N=34），CTCs检出率分别为10.00%（1/10）和52.94%（18/34）（P=0.016）。根据癌症进展情况，研究还将患者分为原位癌组（in situ cancer group，N=11）、微侵袭组（microinvasive group，N=14）和侵袭组（invasive group，N=9），CTCs检测率分别为45%（5/11）、50%（7/14）和67%（6/9）。根据CTCs计数区分良恶性结节的ROC曲线下面积为0.715（P=0.041）。研究结果表明，在癌症患者中，CTCs检测率和计数随着疾病进展而增加，体内CTCs检测策略在早期肺癌诊断中的敏感性和特异性分别为52.94%和90%。
疑似肺癌患者和健康对照的CTCs检测
本研究在64例样本中证实了CTCs检测技术可以有效区分良性和恶性结节，在健康人、良性结节、恶性结节患者中，CTCs检出率分别为0、10%（1/10）和52.94%（18/34）。此外，体内捕获的CTCs还可以用于早期肺癌的有效诊断。随着结节侵袭性的增加，CTCs的检出率也得到小幅度的提高。然而，这项研究还存在有一些局限性。例如较少的样本量，CTCs PD-L1阳性患者未进行相关随访，缺少患者的预后信息。研究认为今后CTCs检测标准应该进一步标准化，并基于一项样本量更大、患者群体异质性更高的前瞻性研究来评估CTCs检测在肺癌筛查中的价值。
文案撰写：晶准生物医学（深圳）医学事务部
参考文献：
晶准医学核心产品CTC100技术平台（NMPA II类&CE认证）以自主专利的微流控芯片技术为临床提供较高的样本目标细胞分筛效率，精准分离富集高纯度的循环肿瘤细胞（CTC），结合了多重肿瘤标记物的严谨鉴定方式，同时保持了细胞活性高及完整性的特点，灵敏度高，特异性高。同时，利用晶准医学液体活检多平台的特点，CTC技术创新性地结合数字PCR以及NGS测序技术，解决了CTC计数分型临床复合率差、单细胞测序、靶向蛋白检测、细胞培养、PCR等下游应用场景无法开展的难题，为肿瘤液体活检提供整体全面的解决方案。
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