2022年第六期·肿瘤液体活检临床学术文献汇编
肿瘤液体活检临床学术文献汇编
（2022年第六期）
晶准生物医学（深圳）有限公司
本期文章摘要
本期共摘取三篇文章：
第一篇文章于2020年发表在《Clinical Cancer Research》杂志上（影响因子
12.53），该项研究揭示了III期黑色素瘤患者循环肿瘤细胞（CTC）计数与癌症复发的相关性。该研究通过对比243例III期黑色素瘤患者的外周血CTC计数以及对应的无复发生存期（RFS）后发现，外周血中CTC ≥ 1与患者RFS显著相关。该研究证实了CTC检测在黑色素瘤中的临床意义，CTC检测有助于预测患者的治疗后复发风险，以及可以筛选适合接受辅助治疗的患者。
第二篇文章于2021年发表在《Cancers》杂志上（影响因子6.639），该研究 揭示了CTC计数与胰腺导管腺癌患者预后情况的相关性。通过治疗后5-10年的随 访，该研究发现血液中CTC阳性的患者与CTC阴性的患者相比无病生存期（DFS） 以及肿瘤特异性生存期（CSS）显著较短，且所有术前检测为CTC阳性的患者均 出现了远端转移。该研究有效地验证了在接受手术切除的PDAC患者中，CTC的 存在预示着早期远端转移和生存期的降低。术前对PDAC患者进行CTC检测可以 更好地对治疗进行指导。
第三篇文章于2021年发表在《BMC Cancer》杂志上（影响因子4.4）。该研究指出CTC可以作为肝癌患者手术后复发或出现微血管侵犯（MVI）的生物标志物。通过对手术前后不同节点的肝癌患者的CTC数量以及患者临床病理学特征以及血清肿瘤标志物进行单变量和多变量相关性分析，发现CTC阳性与复发风险增加相关。不同的指标联合CTC监测信息可以大幅提高预后的准确性。该研究 证实了手术前后血液中的CTC可用于预测患者复发风险。
Circulating Tumor Cells and Early Relapse in Node-positive Melanoma
结果：在被纳入的243例患者中，有90例（37%）患者基线CTC≥1。45例（19%）、67例（28%）、
结论：CTC≥1与黑色素瘤复发独立相关，该研究表明CTC评估可能有助于识别有复发风险的患者，这些患者可能从辅助治疗中获益。
关于黑色素瘤CTC的研究已长达30多年。尽管这些研究中有许多都证明了CTC具有预后意义， 但由于CTC检测具有不同的方法，且缺乏统一的标准，影响了CTC的临床应用。
该项研究探索了CTC对III期皮肤黑色素瘤患者的鉴定率和预后意义。这是首批讨论CTC是否与III期黑色素瘤患者的复发具有相关性的前瞻性研究之一。如果这一假设得到验证，则可以通过更大规模的研究以促进CTC在黑色素瘤临床实践之中的应用。这将具有极大的临床意义，因为目前NCCN 和ASCO还没有推荐具有黑色素瘤特异性的血液生物标志物，用于鉴定具有高复发风险的Ⅲ期黑色素瘤患者。
该研究共纳入243例III期黑色素瘤患者。平均年龄为57岁（20-88岁），中位随访时间为17个月（1-64个月）。243例患者中有90例（37%）测出≥1个CTC/7.5ml血，有41例（17%）为≥2个CTC/7.5ml 血，有12例（5%）为≥3个CTC/7.5ml血。有33名患者（14%）在CTC基线评估后的6个月内出现了疾病复发。
单变量分析表明，基线CTC≥1的患者在6个月内的RFS显著下降（图1-1a），同时，该组有23%（21/90）的患者在6个月内复发，而CTC=0的患者中只有8%（12/153）在6个月内复发。基线CTC≥1的患者6个月内的RFS率远低于CTC=0的患者（P < 0.0001）。此外，多变量Cox回归模型的结果也进一步证实，在校正了病理淋巴结分期、性别、年龄、Breslow厚度、溃疡和淋巴血管浸润后，基线CTC≥1仍然是6个月内复发的独立预测因素（P = 0.018）。单变量分析还表明，基线CTC≥1的患者在54个月内显示RFS显著降低（图1-1b），该组有48%（43/90）的患者在整个随访期间复发，而CTC=0 的患者中有37%（56/153）复发。多变量Cox回归模型也再一次证实，基线CTC≥1仍然是54个月内复发的独立预测因素（P = 0.006）。
这是首次发表的使用液体活检技术对结节性黑色素瘤患者进行的前瞻性研究，表明血液中的CTC可以预测6个月内的复发情况。该项研究为将来通过液体活检筛选适合辅助性系统治疗的最佳人选提供了数据上的支持。当前对于结节性黑色素瘤患者的辅助性系统治疗方式暂未建立明确的共识，CTC和早期复发的相关性可以为与辅助治疗相关的临床试验提供基础。
术前循环肿瘤细胞检测与胰腺癌切除后早期远端转移和生存率下降相关
发表时间：2021年2月发表期刊：Cancers
挪威奥斯陆大学Harald H团队发表了胰腺导管腺癌（PDAC）术前循环肿瘤细胞（CTC）检测结果与术后转移风险以及生存期下降的相关性研究。该团队开展了一项前瞻性的临床试验，纳入了98例PDAC患者，并对其进行长达5-10年的随访。 该研究数据显示，PDAC患者手术前血液中检测出CTC与术后出现早期远处转移和生存率下降显著相关。
胰腺导管腺癌（PDAC）的预后结果往往不佳。死亡率与发病率的比例为0.96，是死亡率最高的实体肿瘤之一。在过去的几十年里，尽管化疗、放疗和手术等治疗手段有所改进， 但病人的临床结局几乎没有变化。针对局部肿瘤的切除手术是目前唯一有可能彻底治愈PDAC患者的治疗方法，而在未接受手术的人群中，5年生存率低至5-9%。约有一半的患者 在术后的第一年内经历复发。尽管在出现局部复发时采取积极治疗有可能延长生存期，但并 没有可以完全治愈复发患者的手段。目前已知的术前风险评估方式的预后能力有限，只能通 过基于组织病理学的术后分析得到更为准确的患者生存率。虽然术后可获得的预后因素可能 对患者的术后护理有价值，但术前风险评估的缺乏极大影响了可切除PDAC患者的治疗效果。
目前已有研究证明，术前在患者外周血样本中出现的循环肿瘤细胞（CTC），与多种癌症的转移复发和生存率下降有关。其中与PDAC患者相关的研究表明，血液中检测到CTC是患者生存率下降的一个重要的风险因素。门静脉血中检测到CTC与PDAC的肝转移有关，但外周血中的CTC与特定类型的复发相关的研究仍是空白。该研究主要验证接受手术切除的PDAC患者中与复发和预后相关的风险因素，以及对应的CTC状态。
该研究纳入了98例患者，观察时间的中位数为96个月（范围63-126），6例（6.1%）患者在研究结束时存活。4例患者死于癌症进展，2例患者由于早期癌症复发在研究开始后的90天内死亡，1例患者死于肺炎且没有癌症复发的迹象。在87例经影像学证实的复发病例中，有58例（67%）出现远端转移（DM），其中16例伴有局部复发。29名患者（33%）出现了孤立局部复发（ILR）。
图2-2 术后PDAC患者的生存和复发时间，以及对应的病理情况
图2-3为观察期间发生远处转移的患者的孤立生存结果，显示CTC阳性患者的CSS和DFS 均出现降低。同时，复发后的生存率也受到CTC数量的显著影响（p = 0.008）。
Preoperative circulating tumor cells to predict microvascular invasion and dynamical detection indicate the prognosis of hepatocellular carcinoma 术前循环肿瘤细胞检测结果与微血管侵犯以及肝细胞癌预后的相关性
研究背景：该研究探讨了术前循环肿瘤细胞（CTC）对微血管侵犯（MVI）的诊断能力以及术后CTC的动态变化与肝癌患者预后的关系。
研究方法：该研究纳入了137例患者。每例患者均被收集了外周血以检测CTC。采血时间点为术前、术中、术后1周、1个月、2个月、3个月、6个月、1年。研究者们通过ROC曲线分析了CTC计数对MVI的预测能力。137名患者根据复发状况被分为三组：（1）无复发组、（2）早期复发组、（3）非早期复发组。
研究结果：CTC≥5是预测MVI是否存在的最佳阈值。在多因素分析中，术前CTC计数、甲胎蛋白（AFP）和肿瘤直径是MVI的独立预测因素（P<0.05）。术前CTC≥5比AFP > 400μg/L和肿瘤直径> 5 cm具有更好的预测价值。与手术前相比，三组的术中CTC数量并没有增加（P>0.05）。与术中值相比，不复发组和非早期复发组的CTC数量在术后1周明显减少（P<0.001），早期复发组则没有明显的差异（P=0.95）。平均CTC计数≥5的患者的长期预后比平均CTC计数<5的患者显著较差（P<0.001）。
研究结论：肝细胞癌患者术前外周血中的CTC数量与MVI密切相关。医生对病灶处的手术操作并不会增加外周血中CTC的数量，然而肿瘤的切除会减少CTC的数量。手术后CTC持续≥5表明有早期复发的风险。
循环肿瘤细胞（CTC）是指从原始肿瘤或转移灶脱落后在血液中循环的肿瘤细胞，可以在患者体内引发新的转移。通过上皮间质转化（EMT）过程，CTC最终演变成一部分间质性
HCC患者和良性肿瘤患者的术前外周血CTC计数如图3-1a所示。18名肝脏良性肿瘤患者的CTC数量均为0（P<0.001）。MVI阳性患者和MVI阴性患者的CTC数量对比结果见图3-1b。MVI阳性组和MVI阴性组的血液CTC水平差异具有统计学意义（P<0.001）。
对CTC的cut-off值的分析如图3-2a所示。CTC的最佳cut-off值可以从CTC值表中计算出来。当CTC=5时，敏感性和特异性分别为91.4%和79.7%，Youden指数达到最大值0.711。AFP、肿瘤直径和术前CTC计数被纳入预测MVI存在的模型。研究者们绘制了AFP、肿瘤直径、术前CTC计数和多参数组合的ROC曲线（图3-2b），这些变量的ROC曲线AUC面积分别为0.636、0.604、0.856和0.900。结果表明，肿瘤直径的cut-off值为5cm和术前CTC计数cut-off值为5是最佳的MVI预测因素。AFP≥400 ng/ml、肿瘤直径≥5 cm、术前CTC≥5和多参数组合的敏感性分别为44.8、50.0、91.4和91.4%，特异性为82.3、70.9、79.7和79.7%。通过比较ROC曲线和AUC面积后发现，与AFP、肿瘤直径和CTC相比，多参数组合预测MVI的能力最佳。
在137名患者中，有59人是MVI阳性。MVI阳性组的OS明显短于MVI阴性组（P = 0.005）（图3-3a）。所有患者被分为三组：无复发组（n = 60），非早期复发组（n = 35）和早期复发组（n = 42）。图3-3b显示了三组患者在不同时间节点的CTC计数。与术中组相比，非复发组（P＜0.001）和非早期复发组（P＜0.001）的CTC数量在术后一周明显减少，而早期复发组术中和术后CTC数量没有明显差异（P=0.950）。生存曲线表明，CTC计数≥5的患者生存时间明显短于CTC计数<5（P<0.001）（图3-3d）。CTC计数≥5的患者早期复发人数比例也高于CTC计数<5的患者（P<0.001）。当CTC计数的平均值大于5，并且在术后仍然持续性大于5时，则表明有较高的早期复发风险。137名患者中有12名发生了肝外转移。该研究发现， 未出现肝外转移的患者CTC数量在术后1周减少，出现肝外转移的患者CTC数量在术后一周异常增加（P < 0.001）。
手术是否会导致CTC进入血液循环从而导致肿瘤细胞的传播一直未达成明确共识。该研究结果表明，肝癌患者的术中CTC数量与术前相比并没有增加，证明了外科医生在术中对肿瘤病灶的操作并不会增加外周血中CTC的数量，无需担心手术会导致肿瘤细胞传播。同时， 肝癌患者术前外周血中的CTC数量与MVI密切相关。肿瘤的手术切除会减少CTC的数量，手术后CTC持续处于高水平（≥5）表明有早期复发的风险。
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